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對於激光共聚焦顯微鏡你了解多少呢?

來源:技術文章    發布時間:2020-05-21    瀏覽:78次
       激光共聚焦顯微鏡是在熒光顯微鏡成像基礎上配置激光光源和掃描裝置,在傳統光學顯微鏡基礎上采用共軛聚焦裝置,利用計算機進行圖像處理,對觀察樣品進行斷層掃描和成像,是一種高敏感度與高分辨率的顯微鏡,在生命科學領域的組織、細胞 和分子水平研究中的應用十分廣泛,主要用於樣品熒光定量檢測,共聚焦圖像分析,三維圖像重建、活細胞動力學參數分析和細胞間通訊等方麵研究。
  激光共聚焦顯微鏡具有出色靈活性的流線型光路,使用少的光元件獲得高靈敏度。熒光發射光穿過具有出色激光抑製性能的主二色分光鏡來提供更佳圖像對比度。使用多達兩個擁有的可變次級二色分光(VSD)來對熒光發射光信號進行光譜分光。能夠連續監測和校正掃描器的位置,以確保穩定平整的觀察視野及在整個觀察範圍內保持恒定的像素曝光時間。這項獲得的線性掃描方式可以在整個掃描區域內(包含待操作的感興趣區域)實現恒定信噪比和均勻曝光。
  高速光活化成像,由於非共振掃描器和共振掃描器集成在一個單元裏,不需要另配獨立的用來做光活化的激光器,光活化和熒光成像就可以同時進行。擁有可以高速成像的共振掃描器使得光活化後快速變化信號的獲取成為可能。
  激光共聚焦顯微鏡通過對樣品X-Y軸的逐點掃描,形成二維圖像。如果在z軸上調節聚焦平麵的位置,連續掃描多個不同2位置的二維圖像,則可獲得一係列的光學切片圖像。在相應軟件的支持下,通過數字去卷積方法(deconvolution)得到清晰的三維重建圖像。正因為激光掃描共聚焦顯微鏡能沿著z軸方向在不同層麵上獲得該層的光學切片,所以可以得到組織細胞各個橫斷麵的一係列連續光學切片,實現細胞“CT”功能。
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